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HILIC親水作用色譜柱的使用及維護方法
  • 發布日期:2023-02-06      瀏覽次數:362
    •   親水作用色譜是一種直接分離極性和親水性化合物的色譜技術,它以親水性的填料作為固定相,以水、有機溶劑和緩沖液作為流動相洗脫劑。在HILIC方法中,洗脫順序和反相色譜正好相反,即極性越大,保留時間越長。
        HILIC親水作用色譜柱的使用及維護方法
        在選擇HILIC親水作用色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等。
        1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的HILIC親水作用色譜柱。
        2.如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換HILIC親水作用色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的HILIC親水作用色譜柱就不能再用于其它實驗)。
        3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質,且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
        4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單,缺點是目前實現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱(缺點是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗)也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換HILIC親水作用色譜柱。
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